Application of near-infrared fluorescent cholangiography using indocyanine green in laparoscopic cholecystectomy

ObjectiveNear-infrared fluorescence cholangiography (NIRF-C) can help to identify the bile duct during laparoscopic cholecystectomy. This retrospective study was performed to investigate the effect of NIRF-C in laparoscopic cholecystectomy.MethodsConsecutive patients who underwent NIRF-C-assisted laparoscopic cholecystectomy (n = 34) or conventional laparoscopic cholecystectomy (n = 36) were enrolled in this study. Identification of biliary structures, the operation time, intraoperative blood loss, and postoperative complications were analyzed.ResultsLaparoscopic cholecystectomy was completed in all patients without conversion to laparotomy. The median operation time and intraoperative blood loss were not significantly different between the two groups. No intraoperative injuries or postoperative complications occurred in either group. In the NIRF-C group, the visualization rate of the cystic duct, common bile duct, and common hepatic duct prior to dissection was 91%, 79%, and 53%, respectively. The success rate of cholangiography was 100% in the NIRF-C group. NIRF-C was more effective for visualizing biliary structures in patients with a BMI of <25 than >25 kg/m².ConclusionsNIRF-C is a safe and effective technique that enables real-time identification of the biliary anatomy during laparoscopic cholecystectomy. NIRF-C helps to improve the efficiency of dissection.     

超声医学专业住院医师核心胜任力培养的教学体会

住院医师规范化培训制度是医学生毕业后教育的重要组成部分及核心内容,是提高医疗质量,保障民众健康的重要举措。超声医学作为重要的医学影像技术之一,临床应用十分广泛,在疾病诊断、治疗、疗效评估和随访中发挥了重要作用。超声医学专业住院医师具有专业性强,操作技能依赖性高的特点,需要扎实的解剖、病理、生理和广泛的临床基本知识,能够对脏器进行全面检查并快速判断异常征象,立即给出诊断和鉴别诊断。如何培养兼具六大核心胜任力的住院医师,各个住培基地的培养模式将影响区域所辐射的超声行业发展。本人作为一名年轻的住培教师,在基地教学主任指导下,重点分享我院住院医师培养的师资培养和住院医师核心胜任力培养,旨在促进同行交流,不断改进教学和培养能力,提升学员核心胜任力。     

不同转移潜能人神经母细胞瘤细胞系趋化因子受体CXCR4的表达及对瘤细胞趋化作用的影响

目的 以自建的人神经母细胞瘤转移瘤(QDDQ-NM1)及原位瘤(QDDQ-NM2)细胞系的细胞为研究对象,探讨CXCR4在不同转移潜能人神经母细胞瘤细胞系细胞中的表达情况及其对瘤细胞趋化作用的影响.方法 采用RT-PCR检测两神经母细胞瘤细胞系细胞CXCR4 mRNA的表达;流式细胞仪直接免疫荧光法检测两细胞系细胞膜表面CXCR4蛋白的表达;通过趋化和趋化抑制实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对QDDQ-NM1和QDDQ-NM2细胞系瘤细胞的趋化作用.结果 RT-PCR显示QDDQ-NM1细胞系CXCR4mRNA的相对含量为0.57±0.08,QDDQ-NM2细胞系为0.29±0.05,两者比较差异有统计学意义(P=0.005＜0.05),流式细胞仪直接免疫荧光法检测两细胞系细胞膜表面CXCR4蛋白表达的阳性率分别为(64.59±1.57)%和(36.72±0.57)%,两者的差异有统计学意义(P=0.00＜0.05),CXCR4特异性配体CXCL12可在一定范围内呈浓度依赖性的趋化QDDQ-NM1和QDDQ-NM2细胞系细胞的迁移,以100 ng/ml的效果较为明显,两细胞系迁移到聚碳酸酯膜下的细胞数差异有统计学意义(P＜0.05).CXCR4特异性拮抗剂AMD3100能有效抑制这种趋化作用(P＜0.05).结论 QDDQ-NM1细胞系的细胞功能性高表达趋化因子受体CXCR4,可能与人神经母细胞瘤QDDQ-NM1细胞系细胞的体外高转移潜能有关.

Abstract：

Objective To study the expression of functional chemokine receptor CXCR4 and its effects on the metastatic potential of human neuroblastoma.Methods Two human neuroblastoma cell lines were used in this study,including QDDQ-NM1 with high metastatic potential and QDDQ-NM2 with low metastatic potential.The expression of CXCR4 was explored at mRNA level using RT-PCR,and the protein level by flow cytometry.Chemotaxis assay was also performed to study the migratory response of QDDQ-NM1 and QDDQ-NM2 to CXCR4 ligand CXCL12.Results The mRNA of CXCR4 was higher in QDDQ-NM1 group than that in QDDQ-NM2 group (0.57±0.08 vs 0.29±0.05,P =0.005).The expression of CXCR4 on QDDQ-NM1 group was also higher than that in QDDQ-NM2 group [(64.59 ±1.57) % vs (36.72 ± 0.57) %,P＜0.05] The QDDQ-NM1 cells exhibited stronger migratory response to CXCL12 in a concentration dependent manner (P＜0.05),and the response peaked to CXCL12 at 100 ng/ml.AMD3100,a specific CXCR4 antagonist,could reverse the tumor's migratory response to CXCL12.Conclusions The expression of CXCR4 is associated with the metastatic potential of human neuroblastoma.     

白介素24在子痫前期胎盘的表达及与基质金属蛋白酶2关系的研究

目的:研究IL-24在子痫前期胎盘的表达及rhIL-24对TEV-1细胞MMP-2蛋白活性表达的影响,探讨二者与子痫前期发病机制的关系。方法:RT-PCR检测子痫前期及正常足月孕妇胎盘中IL-24 mRNA的表达;明胶酶谱检测0、10、50、100、500ng/mlrhIL-24作用后TEV-1细胞的MMP-2活性;Western blot检测不同浓度rhIL-24作用后TEV-1细胞的MMP-2蛋白表达。结果:子痫前期组胎盘组织中IL-24 mRNA表达显著高于正常足月组(P<0.05)。当rhIL-24浓度≥50ng/ml后,TEV-1细胞中MMP-2蛋白活性表达均明显降低(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性。结论:IL-24异常升高,抑制了滋养细胞MMP-2的分泌及活性,使其侵袭力下降,从而在子痫前期发病中起一定作用。     

血卟啉对人胰腺癌细胞Panc-1的光动力作用及机制

目的: 研究光敏剂血卟啉的光动力作用对人胰腺癌细胞Panc-1的体外杀伤效应及其主要机制。方法: 将光敏剂浓度和光照剂量2个因素按不同水平分组,以CCK-8实验的吸光度值为检测指标并转换为细胞存活率,研究这2个因素对光动力作用的影响及其规律。在此基础上,先后以荧光显微镜、流式细胞仪、Western blotting测定这一过程中细胞内活性氧的水平、细胞坏死及凋亡比率以及caspase-3蛋白的表达,探讨光动力作用的主要机制。结果: 随着光敏剂浓度和光照剂量的增加,光动力治疗(PDT)后Panc-1细胞存活率相应下降,并分别在光敏剂浓度10 mg/L、光照剂量20 J/cm²达到最大杀伤效应。光敏剂浓度和光照剂量之间对降低细胞存活率有协同作用。单独给予光敏剂和光照均不对细胞存活率产生影响。PDT作用可使 Panc-1细胞内产生活性氧,并随光敏剂浓度和光照剂量的增加而增多。PDT后细胞出现凋亡和坏死,二者比例随光敏剂浓度和光照剂量的增加而增加,但始终表现为凋亡率＞坏死率。PDT使细胞内caspase-3表达增强,并随光敏剂浓度和光照剂量的增加而增加。结论: 血卟啉光动力治疗对人胰腺癌细胞株Panc-1具有明确的杀伤作用,但是光敏剂和激光照射本身并不具有独立的杀伤效应。光敏剂浓度和光照剂量2个影响因素在一定范围内与PDT效应之间呈正相关的关系,二者之间存在协同作用。PDT的作用机制主要在于其产生的各种活性氧成分,通过各种途径激活caspase-3,最终导致细胞凋亡。     

炎性痛致大鼠脊髓后角ProBDNF及其受体的表达变化

目的:探讨完全弗氏佐剂(complete Freund’s Adjuvant,CFA)致炎性疼痛后大鼠脊髓后角内ProBDNF及受体P75NTR和Sortilin的表达变化及意义。方法:大鼠随机分为正常组和实验组,实验组大鼠左侧足底皮下注射CFA和生理盐水混合溶剂100μl,建立炎性疼痛模型,实验组包括注射CFA后6 h、1、3、7和14 d组。采用Von Frey纤维测定不同时间点大鼠机械缩足阈值(pawwithdrawal threshold,PWT)的变化;采用免疫组织化学方法检测ProBDNF及P75NTR、Sortilin在脊髓后角的表达变化。结果:足底注射CFA后1 h PWT即下降,并在6 h后达到最低值,3 d后逐渐上调,至14 d仍低于基础值。ProBDNF在正常脊髓后角可见阳性表达;注射CFA后1 d注射侧脊髓后角较对侧其ProBDNF的表达明显上调,上调持续到7 d左右,至14 d逐渐恢复。正常大鼠脊髓后角P75NTR有较弱表达,主要集中在后角I、II层纤维;注射CFA后6 h开始,注射侧脊髓后角内P75NTR的表达明显上调,III-V层的阳性产物也逐渐增加,这种上调持续到7 d左右达高峰,至14 d逐渐下降。Sortilin在正常脊髓后角浅层仅有较弱阳性产物表达,注射CFA后不同时间点脊髓后角Sortilin的表达无明显差异。结论:CFA能诱导大鼠产生为期2周以上的炎性痛病程;脊髓后角ProBDNF和P75NTR的表达上调可能与炎性疼痛中外周痛觉信号的传导和中枢敏化有关。     

五株EV71病毒毒力、免疫原性与基因组比较分析

目的对5株EV71分离株(LCH01、LCH02、BJ01、BJ02、AH01)进行毒力、免疫原性和基因组的比较分析。方法分别用5株EV71分离株攻击Balb/c乳鼠,比较毒力差异;免疫6～8周龄Balb/c小鼠后收集血清,ELISA检测抗体效价,微量中和实验检测中和抗体效价;反转录获得5株EV71的全长cDNA进行全基因组测序;最后,用CLC Main Workbench 5.5软件对序列进行比较分析。结果通过对VP1基因的比较分析发现,这5株EV71分离株均为C4a亚型。1周龄Balb/c小鼠经脑部注射LCH01株,表现出后肢瘫痪和后继死亡;而注射其它4株EV71的小鼠在观察了14 d之后仍然存活。5株EV71血清抗体效价为210～211,中和抗体效价为27～28,无显著差异。LCH01毒株与其它几株序列相比,在5′-NTR、3′-NTR、3D等处均有明显差异。结论这5株EV71分离株为近几年流行的C4a亚型,具有较高的免疫原性;LCH01毒株的毒力高于其它几株,从基因组水平上找到了差异序列,这为EV71疫苗评价和致病机制研究提供了实验数据和实验材料。     

文拉法辛缓释剂治疗广泛性焦虑症的临床研究

目的探讨文拉法辛缓释剂治疗广泛性焦虑症的临床疗效和安全性。方法将136例广泛性焦虑症患者随机分为文拉法辛缓释剂组68例和阿普唑仑组68例。怡诺思组治疗剂量75~150m g/d,阿普唑仑组为1.2~3.6m g/d,观察时间均为6周。治疗前与治疗第2、4、6周末采用汉密尔顿焦虑量表、焦虑自评量表、副反应量表评定临床疗效和副反应。结果两组疗效相当,差异无显著性（P〉0.05）;阿普唑仑组起效时间快于文拉法辛缓释剂组,但远期疗效差于文拉法辛缓释剂组;怡诺思组副反应明显少于阿普唑仑组（χ2=7.49,P〈0.01）。结论文拉法辛缓释剂治疗广泛性焦虑疗效肯定,安全性高,依从性好,值得临床推广应用。